Получение зародышей от коров-доноров

- Выбор донора.
- Выбор реципиента.
- Синхронизация донора и реципиента.
- Суперовуляция донора.
- Осеменение донора.
- Сбор эмбрионов.
- Оценка эмбрионов.
- Перенос или хранение эмбрионов.

Критерии отбора животных-доноров чаще продиктованы экономическими соображениями.

До недавнего времени перенос эмбрионов был возможен только для очень ценного крупного рогатого скота. Затраты, связанные с переносом эмбрионов, имели тенденцию к условному снижению по мере увеличения экономической и генетической ценности.

Нехирургические методы извлечения и переноса эмбрионов и повышение частоты наступления стельности от замороженных-размороженных эмбрионов значительно снизили затраты на процедуру. При таких исходных данных 10% лучших представителей чистопородного стада можно использовать в качестве доноров и затем осеменить для сохранения межотельного интервала. 90% остальных особей стада могут быть использованы в качестве реципиентов.

Отбор животного-донора мало чем отличается от обычных принципов селекции и должен основываться на трех основных критериях:

При выборе генетически превосходных доноров следует учитывать объективные характеристики, включая:

В настоящее время можно довольно точно оценить генетические достоинства быков-производителей благодаря современным методам секвенирования генома.

При этом, зачастую также учитывается успешный опыт предыдущего поколения при переносе эмбриона: наиболее вероятно будет принято решение в пользу дочерей от хорошей матери-донора.

Стоит также иметь в виду, что потенциальное животное-донор должно находиться в расцвете репродуктивного возраста, иметь в анамнезе высокий уровень воспроизводства и демонстрировать превосходство по признакам, имеющим экономическое значение. Более строгие критерии отбора также включают количество антральных фолликулов и уровни циркулирующего антимюллерова гормона.

Суперовуляция

Для того, чтобы получить большое количество эмбрионов от матери-донора, у нее проводят гормональную стимуляцию для запуска процесса суперовуляции — производства более одной яйцеклетки.

Синхронизация течки

Репродуктивный цикл донора и реципиента должен быть синхронизирован вплоть до часа, так как возрастает риск того, что эмбрион будет неспособен имплантироваться в матку реципиента. Оптимальный способ добиться результата на этом этапе — провести массовую одновременную синхронизацию животных под перенос эмбрионов.

Оплодотворение донора

Оплодотворяют донора во время синхронизированной охоты. На этом этапе необходимо соблюдать стандартные требования к оплодотворению: требуется провести процедуру два или три раза через двенадцать часов.

До 1975 года эмбрионы забирали хирургическим путем. После анестезии (общей или местной) вводили инструмент в матку и забирали эмбрионы. В условиях производства такая процедура была практически нереальной в виду высокой стоимости данных манипуляций и резко возрастающего риска развития спаечного процесса у животного-донора.

В настоящее время применяют нехирургический метод. При этом повреждения отсутствуют или незначительны, что обеспечивает донору возможность повторного донорства эмбрионов, позволяет осуществлять забор на уровне фермы. Недостаток этого метода — возможность забрать эмбрион появляется только тогда, когда он попадает в матку, когда как при хирургическом методе имеется возможность забрать эмбрионы, пока они находятся в яйцеводе.

Животное-донора фиксируют, проводят гигиену половых органов, затем проводят ректальное исследование яичников на количество желтых тел, которое будет свидетельствовать о количестве эмбрионов. При необходимости проводят обезболивание половых органов для уменьшения количества лишних движений.

Забор осуществляется с помощью катетера. Используются три вида катетеров: наиболее часто используется катетер Фоули.

При операции происходит сжатие рога матки, туда вводится жидкость и проводится ее отсасывание. В данном материале будут находиться эмбрионы. При безоперационном заборе стоит контролировать положение катетера, чтобы эмбрионы не могли пройти из рога в матку.

Стоит помнить о том, что дезсредства вредят эмбрионам, поэтому дезинфекцию необходимо проводить заранее, желательно за неделю до планируемой операции, а затем хранить оборудование в стерильных условиях.

Забор эмбрионов производится во время диэструса, когда шейка матки закрыта, но в нее все еще можно проникнуть. Для этого используется стальной стержень, известный как расширитель шейки матки.

Катетеры для сбора эмбрионов недостаточно жесткие, потому что они резиновые. Для придания жесткости катетеру в него вставляют стальной стержень и после прохождения шейки матки его направляют к одному из рогов. После попадания в рог матки, катетер фиксируют, стальной стержень удаляют. Наполняют рог с помощью жидкости и отсасывают ее, при этом 85% эмбрионов оказывается в жидкости от первого промывания. Процедуру несколько раз повторяют и отправляют материал в лабораторию для отделения эмбрионов.

Примечание

В текстах наших статей описание целей, задач, дизайна, результатов иностранных и российских исследований и выводов, сделанных их авторами, является кратким пересказом в нашей интерпретации, который не следует считать исчерпывающей и точной информацией об указанных исследованиях.

Если вас интересуют точная и полная информация об этих исследованиях, следует читать источники по ссылкам, приведенным после статей, где применимо.